Das Mädchen-Internat St. Trinian ist berüchtigt für seine unorthodoxen und anarchistischen Lehrmethoden und steht kurz vor der Pleite. Das kommt Geoffrey Thwaites (COLIN FIRTH) gerade recht! Als neuer Bildungsminister möchte er diesen Schandfleck mit allen Mitteln von der Landkarte Englands entfernen.
Doch er hat die Rechnung ohne die rebellischen Internatsschülerinnen gemacht. Angeführt von der schrägen Direktorin und Thwaites Ex-Flamme Camilla Fritton (RUPERT EVERETT) schmieden sie einen wilden Plan. Während das sexy Trio Chloe (ANTONIA BERNATH), Chelsea (TAMSIN EGERTON) und Peaches (AMARA KARAN) in einem Wissensquiz in der National Gallery die intellektuelle Ehre von St. Trinian verteidigt, nutzen die furchtlosen Mädels um Kelly (GEMMA ARTERTON) und Annabelle (TALULAH RILEY) die Show ganz anders: Über den Köpfen des Publikums klauen sie in einer waghalsigen Aktion Jan Vermeers berühmtes Gemälde „Das Mädchen mit dem Perlenohrgehänge". Doch wird diese vereinte Girl-Power das Internat vor der Schließung retten können?